PCR Basics

полимеразна верижна реакция ( PCR) е метод за ДНК репликацията . Методът се нарича след ДНК полимераза ензим се използва за катализиране на процеса на репликация на ДНК . Кари Мълис развита техниката през 1984 г. и е удостоен с Нобелова награда за химия за работата си през 1993 година. Заявленията на PCR

Общи приложения на PCR включват ДНК снемането на пръстови отпечатъци (в който ДНК фрагменти са изолирани и в сравнение с съществуващи данни ) , анализ на изключително малки количества за подбор ( което дава възможност на учените да реконструират изчезнали организми и починали исторически личности ) и диагностика на заболяването ( включително вирусна ДНК и изследвания на рака ) . Наем PCR Components

необходимите компоненти и реагенти от PCR реакция са : геномна ДНК ( шаблона да репликира ); две грундове ( една напред и една назад) , допълващи се с последователност на ДНК шаблон; коктейл реакция ( включително Taq полимераза и разтвор на буфер, който осигурява надеждна среда, в която ще се извърши реакцията); и субстрат за ензима Taq ( нуклеотиди , които ще помогнат "Билд " отделните направления ) .
Наем стъпки на PCR

Стъпките на реакцията са : денатурация ( през който температурата се повишава до отделяне нишки ДНК матрица ); Каляване на грунда (по време на които температурата се охлажда за насърчаване на свободно плаващи последователности грунд да се придържат към отделни нишки ДНК образец); и разширение ( по време на които Taq полимеразата се придържа към праймер и използва свободно плаващ нуклеотиди да възпроизведе всяка изолирана ДНК шаблон верига ) . Повтаряйки този процес няколко пъти ще изолира всеки повторен последователност от първоначалната си матрична ДНК . Всяко повторение експоненциално увеличава количеството на повторен ДНК докато има достатъчно количество за желания експеримента. За оптимална температура и други условия , вижте " Проектиране PCR Programs " Yale University в ресурси , по-долу. Наем Етапи на PCR

Реакцията може да бъде описан в три етапа : Усилване ( по време на които ДНК се реплицира експоненциално ); Хоризонтален участък ( по време на които полимераза Taq губи активност); и плато ( през което време не повече продукт може да се получи в настоящата реакция ) . За интерактивна демонстрация на реакцията PCR , вижте Университета на Юта " PCR Virtual Lab " в ресурси , по-долу.