Разлика между преки и Непряко ELISA

Един ензим - свързан имуносорбентен анализ (ELISA ) включва реакцията на комплекс антитяло - ензим с антиген или антитяло проведе неподвижно върху твърда повърхност . На инкубация на ензима конюгиран с подходящ субстрат, продукт се образува . Образуването на продукта помага за откриване на наличие на антиген или антитяло и неговото количество осигурява мярка за количеството на антиген - антитяло реакция , които се появяват . Тестът ELISA може да се извърши в две форми : преки и непреки . Test Format

В директен тест ELISA , първично антитяло се задържа по стените на микротитърна плака . Когато се добавя проба се предполага, че съдържа антиген , има антиген - антитяло реакция. След това се прибавя ензим - свързано вторично антитяло , което е способно да реагира с антиген . Ако антиген присъства в пробата , той се свързва с този ензим - свързаният антитяло . Когато се добавя безцветно субстрат , ако цвят , това показва наличието на антиген . В индиректен ELISA антиген се провежда по стените на микротитърната плака . Когато се добавя проба се предполага, че съдържа антитела , антиген - антитяло реакция настъпва . След това се прибавя ензим - свързано вторично антитяло, способно на взаимодействие с несвързан регион на антитялото . Когато се добавя безцветният субстрат , това води до развитие на цвят , ако пробата се използва съдържа антитела.


Лесен за тестване

A широк диапазон на белязаните вторични антитела са търговски на разположение . Освен това е възможно да се създаде няколко първични антитела в даден вид и се използва същата вторично антитяло за откриване . Това прави непряка ELISA лесно да се изпълни. В директен ELISA , първичните антитела трябва да бъдат специално подготвени да реагират с антиген специфичен съмнение да присъстват в пробата . Това прави директна ELISA неблагоприятна в сравнение с индиректното теста.