Как може да се определи наличието на урея в урината?
Има няколко метода за определяне на наличието на урея в урината, включително:
1. Уреазен тест: Това е прост и често използван метод за откриване на урея в урината. Уреазата е ензим, произвеждан от определени бактерии, като Bacillus, Proteus и Klebsiella, които хидролизират уреята, за да произведат амоняк.
Процедура :
- Няколко капки урина се поставят върху филтърна хартия.
- Към пробата от урина се добавя капка разтвор на ензима уреаза.
- Ако има урея, ензимът разгражда уреята, освобождавайки амоняк.
- Наличието на амоняк се показва чрез промяна на цвета. Например, ако като индикатор се използва фенолово червено, то ще се превърне от жълто в розово в присъствието на амоняк.
2. Тест за натриев хипохлорит: Този тест се основава на реакцията на урея с натриев хипохлорит (белина) за получаване на азотен газ. Наличието на мехурчета азотен газ показва наличието на урея.
Процедура :
- В епруветка се вземат няколко милилитра урина.
- Към урината се добавят няколко капки разтвор на натриев хипохлорит.
- Ако има урея, ще настъпи реакция на газиране, освобождавайки мехурчета азотен газ.
3. Тест за нинхидрин: Този тест се основава на реакцията на урея с нинхидрин, химичен реагент, за получаване на пурпурен комплекс.
Процедура :
- В епруветка се вземат няколко милилитра урина.
- Към урината се добавят няколко капки реактив нинхидрин.
- Сместа се загрява леко.
- Ако има урея, ще се образува пурпурен комплекс, което показва положителен резултат.
4. Спектрофотометрични методи: Тези методи включват измерване на абсорбцията на урея при определена дължина на вълната с помощта на спектрофотометър. Уреята има характерен пик на абсорбция в ултравиолетовия (UV) диапазон. Чрез измерване на абсорбцията при определена дължина на вълната може да се определи концентрацията на урея в урината.
5. Хроматография: Техники като тънкослойна хроматография (TLC) или газова хроматография (GC) могат да разделят и идентифицират различни компоненти, присъстващи в урината, включително урея. Уреята може да бъде открита въз основа на нейните специфични хроматографски свойства в сравнение с други съединения.
6. Методи, базирани на биосензори: Усъвършенстваните техники включват използването на биосензори, които специфично откриват урея. Тези биосензори използват различни механизми като електрохимични, оптични или пиезоелектрични принципи, за да осигурят количествено измерване на концентрацията на урея.
Изборът на метод за определяне на наличието на урея в урината зависи от различни фактори като точността, чувствителността, наличността и целта на анализа