Перфузия Техника

техника перфузия осигурява бързо и равномерно фиксиране на всички индивидуални клетки , присъстващи в тъкан . А четири% параформалдехид фиксатор се предава чрез съдовата система за получаване на тъкан от интерес . Основната цел мястото за прилагане на лекарството в определен орган може да бъде идентифициран с помощта на тази техника . Перфузия също така помага на учените да разберат структурна и функционална организация на човешкия мозък . Нещата ще трябва
Animal (плъх или маймуна)
перфузия помпа, стъкленица
Fixative ( 4% параформалдехид )
Спринцовка игли
перфузия капково определени
Ножици
Скалпел <Бразилски> форцепс
0.9% физиологичен разтвор
Ice кутия MarketBook.bg: Покажи повече инструкции
е. 1

Приготвя се пресен 4% параформалдехид чрез смесване на 40 г формалдехид в 800 мл вода. Разтворът се загрява до 60 ° С при разбъркване . Разтворът се охлажда до 4 ° С. рН се коригира до 9,5 с помощта на рН-метър . За регулиране на рН , добавете ледена оцетна киселина, за да се получи желаната рН

2

Настройте перфузия помпа; . Приложи всички стъклени части и перфузия игла . Тичане 100 мл чешмяна вода през тръбичката на помпата перфузия , за да отстраните остатъците от стъклените части . Поставете чаша с фиксатор в ледена кутия.


3

Отворете края на тръбата за перфузия и го поставете в фиксатор чаша. Мащаб обемът на разтвора в зависимост от размера на животното . Сега коригира клапан перфузия помпа за бавно и равномерно да се стича. Затворете вентила. Попълнете апарат перфузия с 0.9% (тегло /обем) разтвор на натриев хлорид .

4

Настройте инструментите хирургия в близост до операционната маса . Инжектиране анестезия на животното, в зависимост от телесното си тегло ( кетамин 0.5 мг /кг ) . Поставете животното на операционната маса с гръб надолу.

5

Направете разрез с дължина със скалпел , по дължината на диафрагмата . С големи ножицата , тъп надолу , нарязани на съединителната тъкан в долната част на диафрагмата . Expose сърцето. Задръжте туптящото сърце с клещите и вмъкнете игла в лявата камера .

6

Отворете вентила на перфузия помпата за да позволи на потока от 0,9% физиологичен разтвор. Уверете се, че разтворът тече свободно и животното е жив . Сърцето на животното трябва постоянно да се бие. След като кръвта се заменя със солеви разтвор , промяна на решението до 4 процента параформалдехид .

7

Спрете перфузията и дисекция на тъкан на интереси. Дръжте тъкан в същата среда при 4 ° С.