Как се извършва Allium Cepa тест за
Лук ( Allium сера ) са използвани за оценка на опасностите за околната среда , като позволява на развиващите се корени, за да влязат в контакт с вещества, които да бъдат тествани . След достатъчно експозиция , корените са извадени , оцветени и накиснати така че клетъчните хромозоми могат да се видят под светлинен микроскоп . Токсичността се доказва , ако са открити хромозомни аномалии или клетъчно деление аномалии. Съвети Корен се използват, защото клетките там са активно растат и се разделят , давайки един добър шанс , за да видите хромозомите по време на различните етапи на клетъчното делене. Нещата ще трябваЛук
Knife
Water
Beakers или други контейнери, за да задържат течности и лук
Test течности
бръснарско ножче или скалпел
Флаконите
Aceto - алкохол фиксатор
микроскоп плъзга
Cover фишове
солна киселина
неръждаема стомана накисване прът
Carbol фуксин петно
Aceto - орцеин петно
Оцетна киселина Канада балсам
Light микроскоп е. Camera приставка за микроскоп MarketBook.bg: Покажи повече инструкции
Настройка на теста
1
Отстранете външната суха кожа на 12 лук. Изстъргва дъното на лука около долната плоча , без да вредят на района, от който ще се появят на корените.
2
Изберете стъкленици, които имат уста достатъчно широк, за да държи на дъното на лука потопени в теста течности . Напълнете чаши с дестилирана вода и се поставя на лука в стъклениците в контакт с водата . Щит страните на стъклениците с алуминиево фолио, за да се симулира подземен мрак. Промяна на вода дневно .
3
Изследвай базите лук след два дни. Roots трябва да са се образували . Оценка на растежа на корена и изхвърлете двата лука с най-слабия растеж на корените .
4
Създаване на втора серия от пет мерителни чаши , всеки съдържащ проба от материала, който се изпитва , като канализацията или промишлени балотаж . Сложете пет на лука в тези мензури . Запазва останалите пет в дестилирана вода като контрола за изпитване. Позволете на корените да растат в продължение на още 24 часа.
Подготовка корените в
5
със скалпел или бръснач , реколта пет до шест корена съвети от всеки лук, запис които са контроли и пациенти , които са били изпитване . Дръжте корени от отделни лук отделят в малки флакони , етикетирани .
6
Fix корен съвети веднага в Ацетосулфатиращата алкохол в съотношение 01:03 . Поставете кореновите върхове за лук върху предметно стъкло и ги накисват в 1N солна киселина , която е същата като 1 моларен солна киселина , при 60 градуса по Целзий в продължение на три минути. Stain мацерирани съвети с carbol фуксин петно , смес от фенол и основен фуксин , че се свързва с елементи в клетъчните стени , така че те да станат по-видими под светлинен микроскоп .
7
Добавете 2 на сто Ацетосулфатиращата орцеин петно в 4 процента оцетна киселина . Тези цветове хромозомите . Разбърква се с накисващото прът . Нанесете покритие приплъзване , го натиснете надолу, за да смачка краищата на корените . Или запечатва краищата с бързосъхнещ лак нокът или за постоянно монтиране на препаратите в Канада балсам , смола от балсам ела смесва или с етерични масла или ксилол. Брой слайдовете така че резултатите ще бъдат записани , но това не е ясно дали всеки е тестов обект или контрола. Наем записване на резултатите от
8
Поставете предметно стъкло на сцената на светлинен микроскоп . Разглеждане на областта под долната увеличение , преминаването към по-голямо увеличение , за да се разгледа хромозоми.
9
Записвайте хромозомни аберации на информационен лист , записване на информация от кодирани броя за всяка глава лук . Включване непълно разделени или разделени хромозоми , микроядра ( допълнителни ядра образуват в края на клетъчното делене , че може да съдържа хромозомна остатъци) , хромозомни пръстени и лепкави и нарушени хромозоми в различни етапи на клетъчното делене. Снимайте всеки слайд.
10
Анализирайте данните с помощта на статистически анализ. Тълкувайте резултатите, за да се прецени дали или не разтворът за изпитване е генотоксичен.