Как да се оцвети агарозни гелове

визуализация на нуклеинова киселина или протеин е от съществено значение за осъществяване на електрофореза с агарозен гел . Ако работите без оцветяване на гела , че няма да бъде в състояние да се види къде пробата сте тестване е достигнато, и следователно измервания на молекулен размер , например, ще бъде строго ограничен . Багрило си гел с помощта на обща , добре изпробвани боя като етидиев бромид ( EtBr ), което флуоресцира под ултравиолетова ( UV) светлина, когато вмъкнати в ДНК или РНК молекули. Боята ще ви помогне при извършването на експеримента си , като демонстрира на молекулите в пробата като тъмносини марка . Нещата ще трябва
защитни ръкавици и очила
Agarose гел
Ethidium бромид
Пипета ( Gilson за малки количества ) Зареждане буфер MarketBook.bg: Покажи повече инструкции
<Бразилски> 1

Носете защитни ръкавици , които са тънки , но защитно и позволи на пръстите и ръцете неограничено движение. Използвайте малка пипета , за да направят някои EtBr (или еквивалентен на петното) от неговата опаковка .

2

Добавете 0,5 микрограма на милилитър от избрания от Вас петно ​​на вашия проба. Покрийте пробата и смесете ръчно . Няколко шейкове трябва да са достатъчни .


3

Добави отрицателно зареден буфер за зареждане към сместа с помощта на пипета. Това дава възможност на оцветени пробата да се види с невъоръжено око , в естествена светлина и елиминира нуждата от скъпо , вредно UV , които иначе биха се разграждат молекулите , в които ви интересуват . Ксилен цианол е често използван зареждащ буфер , но други са налични . Уверете се, че изберете натоварваща буфер, който ще работи със същата скорост като молекулата сте измерване . Ксилен цианол работи със същата скорост като ДНК фрагменти, които са 5000 базови двойки ( Ьр ) в дължина .

4

Използвайте чиста пипета прилага подобрената Ви проба към ямките в началото на си агарозен гел . Обемът приложите зависи от размера на питите гел ( и дебелина и дължина и дебелина гел ) . Да петно ​​проба , а не контрол , така че да може да се определят параметрите, които ви интересуват (като молекулното тегло), правилно и ефективно.

5

Алтернативно , изпълнява Southern Blotting като начин за визуализиране на вашите проба . Трансфер на ДНК върху нитроцелулозна мембрана . Е изложена на хибридизация на сондата. Това не е оцветяване , като такива , но предоставя по- подходяща алтернатива , както е описано от Access Excellence .