Хлорамфеникол Plate Получаване

Хлорамфеникол е широкоспектърен антибиотик , който убива бактериални микроби чрез взаимодействие с тяхната способност да се възпроизвеждат . Този антибиотик е разработен първоначално да се бори с инфекциите при хората , но според Drug.com , тя се използва само сега, тъй като на тази публикация , като последна мярка , когато други лекарства, които не работят поради сериозни странични ефекти като апластична анемия , хипопластична анемия , тромбоцитопения и гранулоцитопения . Chloramphenicol е полезно в изследователска лаборатория за експерименти на молекулярната биология . Когато хлорамфеникол се получава на плоча , може да се използва за откриване на концентрацията на бактериите или да се изолират специфични щамове на бактерии за по-нататъшни експерименти . Нещата ще трябва
дестилирана вода
Chloramphenicol
1,0% триптона
екстракт 0,5% мая
1,0% натриев хлорид (NaCl ) рН 7.0
95 процента етанол
Агар <Бразилски> 2 - литрова колба
магнитна бъркалка
средни магнитна бъркалка
латексови или ръкавици
Laboratory мащаб
Автоклав е. 30 стерилни 10 cm плочи
Blue маркер <Бразилски> Parafilm
алуминий фолио
Автоклав лента на MarketBook.bg Покажи повече инструкции
е. 1

Сложете си чифт латексови или ръкавици, за да се подготви бульон LB. LB бульон е обща съкращението за Lysogeny бульон или Luria бульон , и е , както е използван като растежна среда за култивиране на бактерии . Тя може да се направи от нулата в лабораторията , или да спестят време той може да бъде закупен от всеки молекулярната биология склад доставчик.

2

Поставете лист хартия с тегло по скалата . Натиснете бутона нулиране на скалата , така че теглото на хартията не е включен в крайното тегло . Добави малки количества триптона в даден момент, докато стигнете до 10 гр . След това сгънете хартията тежи наполовина с Tryptone в центъра . Вдигни тежи хартията и внимателно използвайте сгъната хартия като фуния , за да добавите Tryptone в колба от 2 L . Следвайте тази процедура, за да се претегля пет грама екстракт от мая , 10 гр NaCl, и 15 г агар.


3

Капка бъркалката в колбата и центъра на колбата върху магнитна бъркалка плоча . Добавете достатъчно вода, за да донесе решение до 1 литър.

4

Завъртете плаката на смут , и да гледате бъркалката . Табелата трябва да бъде поставена в правилната скорост , за да позволи на бъркалката да се движат на по- умерено темпо , без да се залепи по стените на колбата. Регулирайте настройките , ако е необходимо . Оставете разтвора да седне на чинията , докато всички реактиви са разтворени .

5

Изключете плочата , разбърква се и се простират на 3 - инчов квадратен парче парафин над горната част на колбата , за да покриване и предпазване на колбата от всички замърсители или от разливане . След това покрийте парафилмът с парче алуминиево фолио и добавете парче маркировка автоклав лента в горната част на фолиото.

6

Поставете разтвора в автоклав за течен цикъл в продължение на 20 минути при 15 PSI до тя се стерилизира .

7

колбата се изважда от автоклава . Тя ще бъде много горещо. Разтворът се оставя да се охлади до около 55 градуса по Целзий , като оставите да престои на стайна температура или чрез поставяне на колбата в 65 - градуса по Целзий водна баня.

8

Напръскайте и избършете надолу работата повърхност с 95% етанол, за да предотвратите замърсяване. То също е добра идея да се променят ръкавиците преди работа с плочите.

9

Mark страна и капака на всяка плочка с вертикална синя лента с помощта на писалката маркировка. Това показва плочи съдържат LB бульон и хлорамфеникол .

10

добавя достатъчно хлорамфеникол антибиотик към разтвора , така че концентрацията да достигне желаното количество , в зависимост от бактерии ще работят с . Обща крайна концентрация 100ug/ml . За тази концентрация , добавете 1 ml хлорамфеникол склад (при 25mg/ml ) . Завъртете колбата в кръгови движения , или да го поставите обратно на табелката с магнит разбърква в продължение на 1 до 2 минути , за да се уверите, че е добре смесени .

11

Избършете устата на колбата с етанол , и след това разтворът се излива в плаките , докато те са пълни до половината с разтвора. Нека плочите се втвърдят , покрийте всяка чиния с капак, и да ги съхранявате с главата надолу при 4 градуса по Целзий , за да ги предпази от изсъхване .