Тъканна култура съвети
Тъканни култури е размножаване на клетки в среда на течен растеж в лабораторията за различни научни цели . Например , тъканни култури се използват за диагностициране на генетични заболявания , като среда за отглеждане на вътреклетъчни патогени като бактерии или вируси или в изследвания в самите клетки . Клетки от тъканни култури
Някои клетки се придържат към дъното на блюда на Петри или да останат суспендирани в течността. Клетките могат да бъдат от растителен или животински произход . Клетките, използвани в тъканни култури могат да бъдат първични клетки , което означава, че се събират директно от организъм , или на клетъчна линия, която се поддържа в култура . Клетъчни линии често са раковите клетки , и това трябва да се има предвид, когато планират или тълкуването експерименти.
Отнасяйте Cells Внимателно
прилепнали клетки са отстранени от тяхната чашка на Петри за преминаване от остъргване или с протеаза, обикновено трипсин и EDTA . Scraping убива много клетки и трябва да се използва само при подготовката на клетъчни лизати (течни препарати на съдържанието на клетката за анализ ), или когато трипсин /EDTA абсолютно трябва да се избягва.
Трипсинизиране премахва не само протеините , които се придържат клетки към ястието но повечето други протеини на мембраната на клетката , също . Cells топка и да отнеме известно време, обикновено през нощта , за да възстанови връзка с ястието . Добавяне на минимално количество на трипсин - около 1 ml за колба 25 cm2 - разклащането на колбата за пет секунди или по-малко слой монослой и след това изливане или аспириране на излишък трипсин ще намали размера на трипсин, който е изложен на монослой . Нека клетките почиват в инкубатора през трипсинизация .
След клетките се плъзнат от дъното на блюдото , добавете медии със серум и се впръскват лизат нагоре и надолу пипетата леко . Оставете малко медии, за да останат в блюдото , колкото пипета нагоре и надолу няколко пъти, за да се разпадне кичури и да получите дори окачване .
Не смучете мехурчета в пипетата . Също така, не енергично разбъркайте или вихрови клетъчната суспензия; клетките са много крехки в това сви - нагоре състояние.
