Протокол за трансфекция на GFP

Използването на Green Fluorescent Protein революция молекулярна и клетъчна биология , тя позволи на изследователите да визуализират клетки и протеини, по начини, досега не бяха възможни . Нейното въздействие върху научните изследвания е толкова дълбока , че през 2008 г. Осаму Шимомура спечели Нобелова награда за химия за откритието си и изолиране на GFP от флуоресцентна медузи. Определения

ген е последователност на дезоксирибонуклеиновата киселина в клетки , която е отговорна за производството на специфичен протеин . Плазмид е отделна част от ДНК, която съдържа ген, като GFP . Трансфекцията е метод за въвеждане на плазмида в клетки .


Методи

Трансфекция обикновено включва смесване на ДНК плазмид, съдържащ ген като GFP с липиди или соли . Клетките са изложени на това решение, което създава дупки в клетъчната мембрана , което позволява на плазмида в клетката, където генът може да бъде изразен като протеин . Търговски комплекти трансфекция са налични , или реагентите могат да бъдат направени в лаборатория . Изборът на трансфекционен метод зависи от типа на клетките и плазмиди се използват . The GFP се визуализира и наблюдавано с техника , която открива флуоресценция.