Как Подготовка плочи с агар

молекулярна биология и бактериология употреба агарови плаки за култивиране на микроорганизми като бактерии за експериментиране . Агарът е средството, което се втвърдява , или гелове , средно течност изискван хранителен елемент от микроорганизма , за да оцелеят и да растат . След прехвърля в агар , бактериите растат в различни колонии ( ако отглеждат при ниски концентрации ) или намазки ( ако отглеждат при високи концентрации ) и могат да бъдат събрани за анализ . Биолозите се подготвят агар плочи , тъй като процесът изисква достъп до лабораторни реагенти и машини и добро разбиране на молекулярната биология и стерилни техники. Нещата ще трябва
Ръкавици
Lab палто
Face маска
Bunsen горелка
Laminar качулка поток
стерилни петриеви панички
10 грама екстракт от мая 5 гр Bacto - триптон
<Бразилски> 15гр агарозен
1 ml 1N NaOH
стерилна дестилирана вода
стъклена бутилка
Автоклав лента
Автоклав
добавки , например антибиотици като ампицилин

Покажи повече инструкции

1

Поставете подходяща защитна екипировка, включително ръкавици , една престилка и маска за лице , и деконтаминация на всички повърхности . Работа до Бунзенова горелка или , за предпочитане , в стерилен ламинарен поток . Това предпазва от вредни вещества във въздуха от падане в агар.

2

Извадете стека на Петри ястия от техните опаковки , но с изключение на преопаковане агар плочите. Етикет на външната повърхност на съда ( не капака ) с вида на агар и датата на производство. Положете плочите като един слой с махнати капаци , за да се налива на агар -лесно.


3

Смесете Bacto - триптон , екстракт от мая и агарозен заедно и след това се добавя натриев хидроксид разтвор (NaOH ) . Добави стерилна дестилирана вода, за да се получи 1 л хранителна среда . Този разтвор се прехвърля в стъклена бутилка, с най-малко обем 1.5L . Loosely винт на капака на бутилката и етикета датата на изготвяне и името на медиите . Поставете лента от автоклав лента върху бутилката и я автоклав в продължение на 25 минути. Нека бутилката се охлажда до по-ниска от 45 градуса по Целзий (или тя ще се втвърди преждевременно ), но не по-висока от 50 градуса по Целзий. Можете да съхранявате бутилки охлажда и затвърди агар при 4 градуса по Целзий , и след това се загрява до втечнен . Ако е необходимо за вашия конкретен експеримент или щам на бактерии , се добавя подходящо вида и размера на добавка като антибиотици. Ако медиите е твърде горещо , добавките ще бъдат унищожени , така че внимателно да проверите температурата на медиите , преди да продължите .

4

Изсипете достатъчен обем на агар с половин запълване на чинията , докато агара е все още топла и втечнен . Уверете се, че площта е изцяло покрита . Не изливайте прекомерно количество или нека агара се изкачат на върха на ястието. Дръжте плочите в стерилна атмосфера , като позволява на горелката Бунзен или качулката ламинарен поток да тече непрекъснато. Оставя плочите да определят и след това заменят капаците .

5

изсушават агар плочи за около 30 минути до един час в пещ не по-висока от 37 градуса по Целзий . Алтернативно , можете да ги оставите в капака на ламинарен поток в продължение на три минути или по обеззаразени лаборатория пейка в области с ниско трафик, който не е на течение за един ден или два . Сушене плочите спира всеки бактериален разтвор, поставен върху повърхността на агара от просто разреждане навън и изплъзване, вместо да формират колонии , които се придържат към агар.

6

Внимателно съхранявайте плочите на тъмно и при 4 градуси Целзий . Стека изсушените агар плочи с техните дъна , за да позволи да видите ясно на етикетите и за предотвратяване на микроорганизми и отломки от падаща върху повърхността на агара и ги замърсява . Сложете чиниите обратно в техните опаковки , се покрива с алуминиево фолио и лентата опаковка затвори . Обозначете опакованите плочи с тяхното съдържание и дата на изготвяне. Можете да съхранявате плочите за до два месеца и трябва да ги изхвърли след това.